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Quick-16S/ITS Plus 高通量建库试剂盒 是针对 16S rRNA 基因 V3-V4 可变区高通量测序开发的最简、建库速度最快的试剂盒。
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产品介绍:
Quick-16S/ITS Plus 高通量建库试剂盒 是针对 16S rRNA 基因 V3-V4 可变区高通量测序开发的最简、建库速度最快的试剂盒。
该实验方案适配自动化工作站,仅需一轮荧光定量 PCR / 普通 PCR 反应,即可依靠专用设计引物同步完成目标片段扩增与样本标签添加;所有扩增产物等体积混匀后,仅需单管一次纯化即可得到终文库,省去传统流程多轮 AMPure 磁珠纯化步骤。
无需额外开展文库定量质控(如安捷伦 TapeStation 自动化电泳、琼脂糖凝胶电泳)。依托以上简化设计,整套文库制备流程人工操作时长可大幅缩短至仅 30 分钟。
产品参数:
参数 | 详细 |
扩增引物 | V3-V4 经典 341F/806R 简并引物(不含测序接头)
正向 341f 为两条 17 碱基序列混合;反向 806r 共 24 碱基 |
终文库片段 | 一步 PCR 扩增 + 添加标签后,完整文库长度约 606 bp |
标签体系 | UDI 双端索引,单条标签长度 10 bp;无标签复用,消除测序标签跳变串扰;标签序列文件可页面下载 |
物种覆盖度 | 细菌 84.2%,古菌 75.8%,不扩增真核生物 DNA,适配高宿主 DNA 临床样本 |
配套仪器 | 微量离心机、96 孔板板式离心机;兼容 SYBR Green 的实时荧光定量 PCR 仪 / 普通梯度 PCR 仪;96 孔荧光定量 PCR 板 |
样本上样要求 | 纯化微生物 DNA 总量≤100 ng,样本不得含腐殖酸、酚、高盐等 PCR 抑制杂质 |
测序平台 | 适配 Illumina 全系列平台(MiSeq、NextSeq、NovaSeq),无需定制测序引物;推荐 MiSeq V3 600 循环测序试剂盒 |
产品特点:
· 流程精简,一次性处理 96 份样本仅需 30 分钟人工操作时长,远低于传统 Illumina 方案 4 小时
· 全流程仅一轮 PCR 反应,无需文库均一化步骤,100% 兼容液体处理自动化工作站
· 依托实时荧光定量 PCR 检测,可实现样本内微生物基因拷贝数绝对定量
1. 低嵌合体:对比 HMP、EMP 经典建库方案,依靠 qPCR 精准控循环,粪便样本嵌合体占比稳定低于 2%,大幅减少人工序列干扰
2. 扩增偏好极低:使用 ZymoBIOMICS 标准菌群测序,实测菌群丰度与理论值高度吻合,高低 GC 菌株均可稳定检出
3. 测序均一度高:等体积混样无需精准均一化,样本间测序 reads 变异系数低,避免部分样本测序量不足
4. 绝对定量能力:qPCR 同步记录荧光 Ct 值,可换算原始样本微生物绝对拷贝数,支持菌群绝对丰度分析
· 肠道、粪便、土壤、水体沉积物等环境微生物样本
· 人体血液、组织、痰液等高宿主 DNA 临床样本(不扩增人源真核 DNA,减少无效测序数据)
· 高通量批量样本测序,适配实验室自动化工作站批量处理
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